TB eta DR-TB diagnostikatzeko irtenbide berritzailea #Makro eta Mikro -Test-en bidez!

Tuberkulosia diagnostikatzeko eta sendagaiekiko erresistentzia detektatzeko arma berri bat: Tuberkulosiaren hipersentsibilitatearen diagnostikorako ikaskuntza automatikoarekin konbinatutako sekuentziazio zuzendu berri bat (tNGS)

Literatur txostena: CCa: tNGS eta ikaskuntza automatikoan oinarritutako diagnostiko eredua, tuberkulosi bakteriano eta meningitis tuberkuloso gutxiago duten pertsonentzat egokia dena.

Tesiaren izenburua: Tuberkulosiari zuzendutako hurrengo belaunaldiko sekuentziazioa eta ikaskuntza automatikoa: biriketako hodi pauzifikoetarako eta meningitis tubularretarako diagnostiko estrategia ultrasentikorra.

Aldizkaria: 《Clinica Chimica Acta》

BALDIN BADA: 6.5

Argitalpen data: 2024ko urtarrila

Txinako Zientzien Unibertsitateko Akademiarekin eta Capital Medical Universityko Beijing Chest Hospital-ekin batera, Macro & Micro-Test-ek tuberkulosia diagnostikatzeko eredu bat ezarri zuen, sekuentziazio zuzenduaren (tNGS) teknologia berrian eta ikaskuntza automatikoaren metodoan oinarrituta. Eredu horrek detekzio-sentsibilitate ultra-altua eman zuen bakterio gutxiko tuberkulosia eta meningitis tuberkulosoa lortzeko, bi tuberkulosi motaren diagnostiko klinikorako hipersentsibilitate-diagnostiko metodo berri bat eskaini zuen, eta tuberkulosiaren diagnostiko zehatza, erresistentzia detekzioa eta tratamendua erraztu zituen. Aldi berean, ikusi da pazientearen plasmako cfDNA lagin mota egoki gisa erabil daitekeela TBM diagnostikoan lagin klinikoetarako.

Ikerketa honetan, 227 plasma lagin eta likido zefalorrakideo lagin erabili ziren bi kohorte kliniko ezartzeko, non laborategiko diagnostiko kohorte laginak tuberkulosia diagnostikatzeko ikaskuntza automatikoaren eredua ezartzeko erabili ziren, eta diagnostiko kliniko kohorte laginak ezarritako diagnostiko eredua egiaztatzeko. Lagin guztiak lehenik Mycobacterium tuberculosis-erako bereziki diseinatutako harrapaketa zunda multzo batekin zuzendu ziren. Ondoren, TB-tNGS sekuentziazio datuetan oinarrituta, erabaki-zuhaitz eredua erabili zen laborategiko diagnostiko ilararen entrenamendu eta balioztatze multzoetan 5 aldizko gurutzaketa balidazioa egiteko, eta plasma laginen eta likido zefalorrakideo laginen diagnostiko atalaseak lortu ziren. Lortutako atalasea diagnostiko kliniko ilararen bi proba multzotan sartzen zen detekziorako, eta ikaslearen diagnostiko errendimendua ROC kurbaren bidez ebaluatzen zen. Azkenik, tuberkulosiaren diagnostiko eredua lortu zen.

1. irudia Ikerketa-diseinuaren eskema-diagrama

Emaitzak: Ikerketa honetan zehaztutako LKE DNA laginaren (AUC = 0,974) eta plasma cfDNA laginaren (AUC = 0,908) atalase espezifikoen arabera, 227 laginen artean, LKE laginaren sentikortasuna % 97,01ekoa izan zen, espezifikotasuna % 95,65ekoa, eta plasma laginaren sentikortasuna eta espezifikotasuna % 82,61 eta % 86,36koak. TBM duten pazienteen plasma cfDNA eta likido zefalorrakideoko DNAren 44 lagin parekaturen analisian, ikerketa honen diagnostiko-estrategiak % 90,91eko (40/44) koherentzia handia du plasma cfDNA eta likido zefalorrakideoko DNAn, eta sentikortasuna % 95,45ekoa da (42/44). Biriketako tuberkulosia duten haurrengan, ikerketa honen diagnostiko-estrategia sentikorragoa da plasma laginekiko paziente berdinen urdaileko zuku laginen Xpert detekzio-emaitzekin alderatuta (% 28,57 VS % 15,38).

2. irudia: Tuberkulosiaren diagnostiko ereduaren analisi errendimendua populazio laginetarako

3. irudia: Lagin parekatuen diagnostiko-emaitzak

Ondorioa: Ikerketa honetan tuberkulosiaren diagnostiko-metodo hipersentikor bat ezarri da, eta horrek detekzio-sentsibilitate handiena duen tresna diagnostiko bat eman dezake tuberkulosi oligobazilarra (kultura negatiboa) duten paziente klinikoentzat. Plasmako cfDNA-n oinarritutako tuberkulosi hipersentikorra detektatzea lagin mota egokia izan daiteke tuberkulosi aktiboa eta meningitis tuberkulosoa diagnostikatzeko (plasma-laginak errazagoak dira biltzeko likido zefalorrakideoa baino, garuneko tuberkulosia susmatzen duten pazienteentzat).

Jatorrizko esteka: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/s0009898123004990? via%3Dihub

Macro & Micro-Test tuberkulosia detektatzeko produktuen aurkezpen laburra

Tuberkulosia duten pazienteen lagin-egoera konplexua eta hainbat behar kontuan hartuta, Macro & Micro-Test-ek NGS irtenbide multzo osoa eskaintzen du karkaxa-laginetatik likidotze bidezko erauzketarako, Qualcomm liburutegiaren eraikuntza eta sekuentziaziorako eta datuen analisietarako. Produktuek tuberkulosia duten pazienteen diagnostiko azkarra, tuberkulosiaren erresistentzia farmakologikoaren detekzioa, mycobacterium tuberculosis eta NTMren tipifikazioa, bakterio-negatiboko tuberkulosiaren eta tuberkulosia duten pertsonen hipersentsibilitate-diagnostikoa, etab. hartzen dituzte barne.

Tuberkulosia eta mikobakterioak detektatzeko serieko kitak:

Elementu zenbakia produktuaren izena produktuen probak egiteko edukia lagin mota aplikagarria den eredua
HWTS-3012 Lagin askatzeko agentea Karraskatzeko laginen likuefakzio-tratamenduan erabilia, lehen mailako erregistro-zenbakia lortu du, Sutong Machinery Equipment 20230047. karkaxa
HWTS-NGS-P00021 Qualcomm-en kantitate-detekzio kit-a tuberkulosi hipersentikorrerako (zunda harrapatzeko metodoa) Biriketako tuberkulosi bakteriano negatiboa eta garuneko noduluetarako hipersentsibilitate ez-inbaditzailea (biopsia likidoa) detektatzea; Tuberkulosia edo tuberkulosia ez den mikobakterioekin infektatuta daudela susmatzen duten pertsonen laginak sekuentziazio metagenomika sakonaren bidez aztertu ziren, eta tuberkulosia edo tuberkulosia ez den mikobakterioak infektatuta dauden ala ez detektatzeko informazioa eta mycobacterium tuberculosis-en lehen lerroko erresistentzia-informazio nagusia eman ziren. Odol periferikoa, albeoloen garbiketa-likidoa, hidrotoraxa eta aszitisa, foku-zulaketaren lagina, likido zefalorrakideoa. Bigarren belaunaldia
HWTS-NGS-T001 Mycobacterium tipifikatzeko eta erresistentzia detektatzeko kit-a (anplifikazio multiplex sekuentziazio metodoa) Mikobakterioen tipifikazio-proba, MTBC eta 187 NTM barne.Mycobacterium tuberculosis-en erresistentzia detektatzeak 13 sendagai eta erresistentzia geneen 16 mutazio gune nagusi hartzen ditu barne. Karraskatzea, albeoloen garbiketa-likidoa, hidrotoraxa eta aszitisa, foku-zulaketaren lagina, bizkarrezur-muineko likidoa. Bigarren/hirugarren belaunaldiko plataforma bikoitza

Nabarmenak: HWTS-NGS-T001 Mycobacterium tipifikatzeko eta erresistentzia detektatzeko kita (anplifikazio multiplex metodoa)

Produktuaren aurkezpena

Produktua OMEren TB tratamendurako jarraibideetan deskribatutako lehen eta bigarren lerroko sendagai nagusietan, NTM tratamendurako jarraibideetan erabili ohi diren makrolidoetan eta aminoglikosidoetan oinarritzen da, eta erresistentzia guneek OMEren Mycobacterium tuberculosis complex mutazio katalogoko erresistentziarekin lotutako gune talde bat hartzen dute barne, baita etxeko eta atzerriko puntuazio altuko literaturen ikerketa eta estatistiken arabera jakinarazitako beste erresistentzia gene eta mutazio gune batzuk ere.

Tipifikazio-identifikazioa Txinako Tuberkulosi eta Arnas Gaixotasunen Aldizkariak argitaratutako NTM jarraibideetan laburbildutako NTM anduietan eta adituen adostasunean oinarritzen da. Diseinuko tipifikazio-primerrek 190 NTM espezie baino gehiago anplifikatu, sekuentziatu eta anotatu ditzakete.

PCR anplifikazio-teknologia multiplex zuzenduaren bidez, Mycobacterium-en genotipifikazio-geneak eta erresistentzia-geneak PCR multiplex bidez anplifikatu ziren, eta detektatu beharreko gene-xedeen anplikon-konbinazioa lortu zen. Anplifikatutako produktuak bigarren belaunaldiko edo hirugarren belaunaldiko sekuentziazio-liburutegi handietan eraiki daitezke, eta bigarren eta hirugarren belaunaldiko sekuentziazio-plataforma guztiak sekuentziazio sakonera handiko prozesu baten menpe jar daitezke gene-xedeen sekuentzia-informazioa lortzeko. Erreferentzia-datu-base integratuan dauden mutazio ezagunekin alderatuz (OMEren Mycobacterium tuberculosis complex mutazio-katalogoa eta erresistentziarekin duen harremana barne), tuberkulosiaren aurkako sendagaien erresistentziarekin edo suszeptibilitatearekin lotutako mutazioak zehaztu ziren. Macro & Micro-Test-en karkaxa-laginak tratatzeko auto-irekitako soluzioarekin konbinatuta, karkaxa-lagin klinikoen azido nukleikoen anplifikazio-eraginkortasun baxuaren arazoa (metodo tradizionalenak baino hamar aldiz handiagoa) konpondu zen, eta, beraz, erresistentzia-sekuentziazioaren detekzioa zuzenean aplika daiteke karkaxa-lagin klinikoetan.

Produktuen detekzio-eremua

34sendagaiekin lotutako erresistentzia geneak18tuberkulosiaren aurkako sendagaiak eta6NTM drogak detektatu ziren, estaldura hartuta297erresistentzia guneak; Hamar Mycobacterium tuberculosis mota eta gehiago190NTM motak detektatu ziren.

1. taula: 18+6 sendagai +190+NTM-ren informazioa

Produktuaren abantaila

Egokitzapen kliniko sendoa: karkaxa-laginak zuzenean detektatu daitezke auto-likidotze-agentearekin, kulturarik gabe.

Esperimentu-eragiketa sinplea da: anplifikazio-eragiketaren lehen txanda sinplea da, eta liburutegiaren eraikuntza 3 ordutan amaitzen da, eta horrek lan-eraginkortasuna hobetzen du.

Idazketa eta erresistentzia integrala: MTB eta NTM-ren idazketa eta erresistentzia guneak estaltzen ditu, kezka klinikoaren puntu nagusiak direnak, idazketa zehatza eta erresistentzia detektatzea, analisi software independentea laguntzea eta analisi txostenak klik bakarrarekin sortzea.

Bateragarritasuna: produktuen bateragarritasuna, ILM eta MGI/ONT plataforma nagusietara egokituz.

Produktuaren zehaztapena

Produktuaren kodea produktuaren izena Detekzio plataforma zehaztapenak
HWTS-NGS-T001 Mycobacterium tipifikatzeko eta erresistentzia detektatzeko kit-a (anplifikazio multiplex metodoa) ONT、Illumina、MGI、Salus pro 16/96rxn

Argitaratze data: 2024ko urtarrilaren 23a